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倒置金相顯微鏡的照明方法 知道的人真的少之又少
發(fā)布時間:2020/3/26 13:56:28瀏覽次數(shù):1457
倒置金相顯微鏡
的照明方法:
倒置金相顯微鏡的照明方法按其照明光束的形成,可分為“透射式照明”,和“落射式照明”兩大類。前者適用于透明或半透明的被檢物體,絕大數(shù)生物顯微鏡屬于此類照明法;后者則適用于非透明的被檢物體,光源來自上方,又稱“反射式或落射式照明”。主要應用與金相顯微鏡或熒光鏡檢法。
1.透射式照明
透射式照明法分中心照明和斜射照明兩種形式:
(1)中心照明:這是常用的透射式照明法,其特點是照明光束的中軸與
倒置金相顯微鏡
的光軸同在一條直線上。它又分為“臨界照明”和“柯勒照明”兩種。
A.臨界照明(Criticalillumination):這是普通的照明法。這種照明的特點是光源經(jīng)聚光鏡后成像在被檢物體上,光束狹而強,這是它的優(yōu)點。但是光源的燈絲像與被檢物體的平面重合,這樣就造成被檢物體的照明呈現(xiàn)出不均勻性,在有燈絲的部分則明亮;無燈絲的部分則暗淡,不僅影響成像的質(zhì)量,更不適合顯微照相,這是臨界照明的主要缺陷。其補救的方法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片,使照明變得較為均勻和避免光源的長時間的照射而損傷被檢物體。
B.柯勒照明:柯勒是十九世紀末蔡司廠的工程師,為了紀念他在光學領(lǐng)域的突出貢獻,后人把他發(fā)明的二次成像叫做柯勒照明.柯勒照明克服了臨界照明的缺點,是研究用倒置金相顯微鏡中的理想照明法。這中照明法不僅觀察效果佳,而且是成功地進行顯微照相所必須的一種照明法。光源的燈絲經(jīng)聚光鏡及可變視場光闌后,燈絲像次落在聚光鏡孔徑的平面處,聚光鏡又將該處的后焦點平面處形成第二次的燈絲像。這樣在被檢物體的平面處沒有燈絲像的形成,不影響觀察。此外照明變得均勻。觀察時,可改變聚光鏡孔徑光闌的大小,使光源充滿不同物鏡的入射光瞳,而使聚光鏡的數(shù)值孔徑與物鏡的數(shù)值孔徑匹配。同時聚光鏡又將視場光闌成像在被檢物體的平面處,改變視場光闌的大小可控制照明范圍。此外,這種照明的熱焦點不在被檢物體的平面處,即使長時間的照明,也不致?lián)p傷被檢物體。
(2)斜射照明:這種照明光束的中軸與
倒置金相顯微鏡
的光軸不在一直線上,而是與光軸形成一定的角度斜照在物體上,因此成斜射照明。相襯顯微術(shù)和暗視野顯微術(shù)就是斜射照明。
2.反射式照明
這種照明的光束來自物體的上方通過物鏡后射到被檢物體上,這樣物鏡又起著聚光鏡的作用。這種照明法是適用于非透明物體,如金屬,礦物等。
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